En utilisant un microscope 4Pi avec des faisceaux d’excitation et de désexcitation appropriés, il a été possible de créer un point uniformément de taille 50 nm, ce qui correspond à une diminution du volume focal par rapport à la microscopie confocale d’un facteur de 150 à 200 dans les cellules fixes. Avec la combinaison de la microscopie 4Pi et de la microscopie RESOLFT avec des protéines commutables, il est maintenant possible de prendre des images de cellules vivantes à faible luminosité avec des résolutions isotropes inférieures à 40 nm.